木醋桿菌菌種的發(fā)酵罐培養(yǎng)

摘要:分別采用靜置、底部供氧、間歇式供氧、改進(jìn)供氧系統(tǒng)等4種培養(yǎng)方式，用l0L發(fā)酵罐培養(yǎng)木醋桿菌菌株HN001，研究供氧方式對木醋桿菌生物量的影響。結(jié)果表明，通過發(fā)酵罐培養(yǎng)木醋桿菌，生物量的變化并未隨溶氧量增大而增大。不同供氧方式發(fā)酵液中的溶氧量不同，底部供氧方式溶氧量******，但這種培養(yǎng)方式形成了較大的攪拌和剪切力，生產(chǎn)菌株容易產(chǎn)生負(fù)突變，木醋桿菌生物量最小;改進(jìn)供氧系統(tǒng)培養(yǎng)方式通過發(fā)酵罐底部盤旋至頂部的招期交管供氧，對培養(yǎng)液的攪拌和剪切力較小，比生產(chǎn)中常用的靜置培養(yǎng)方式增加了近10倍，同時也優(yōu)于底部供氧、間歇式供氧培養(yǎng)方式。

    發(fā)酵罐參數(shù)設(shè)定:設(shè)定發(fā)酵溫度30℃，pH值4.2,攪拌速度及其調(diào)控方式依培養(yǎng)方式不同而設(shè)定不同。靜置培養(yǎng)攪拌速度為0r/min;攪拌培養(yǎng)速度設(shè)為45r/min,調(diào)控方式為自動;間歇性攪拌培養(yǎng)速度設(shè)為45r/min,調(diào)控方式為手動;改進(jìn)后培養(yǎng)速度設(shè)為45r/min，調(diào)控方式為手動。

    滅菌：發(fā)酵罐空罐滅菌后，將6.5L配制好的液體培養(yǎng)基加入發(fā)酵罐中，調(diào)控進(jìn)出汽量，使壓力維持在0.1MPa,罐內(nèi)溫度達(dá)到 121℃時保持5min，切斷蒸汽供應(yīng)，滅菌結(jié)束。

    培養(yǎng)：罐內(nèi)溫度冷卻至30℃后，接種300mL木醋桿菌液體種，儀器線路、管路連接好后便開始發(fā)酵培養(yǎng)。每12h記錄溶氧量((DO值)(由發(fā)酵系統(tǒng)溶氧電極測定，并在液晶控制面板顯示，以百分比含量計)，每24h測定菌液生物量。